【慢病毒的应用场景】目前,慢病毒载体在生物医学领域的应用主要集中在几个关键方面:细胞基因治疗(截至目前,已有9款CAR-T产品采用慢病毒载体递送CAR基因)、基因表达调控(如过表达与RNA干扰的研究)、基因编辑(涉及CRISPR/Cas9 gRNA文库筛选、基因敲除、敲入、点突变,以及基因激活/抑制)、稳定转基因细胞株构建,以及活体细胞成像和转基因动物跟踪等。慢病毒载体的广泛应用助力了许多生物医疗研究的进展,成为了前沿技术的重要工具。
【应用案例】在一项研究中,设计了用于ADPGK过表达的慢病毒结构,并取得了良好的过表达结果。此外,另一实验展示了慢病毒介导的特异性shRNA对PHD2、RyR2和IP3R的有效敲低。还有研究指出,LRP1在小鼠和猪的耳蜗细胞中广泛表达,特别是在BLB区域和目标细胞中。通过靶向LRP1的配体肽IETP2,能够将不同的分子如荧光染料、抗氧化药物和MRI造影剂传递至内耳。这表明LRP1可能是开发非侵入性针对性药物递送策略的有效靶点,从而提高内耳疾病的治疗效果。LRP1在细胞内吞作用中也发挥着关键作用,通过实验验证了IETP2肽与LRP1结合后细胞内化的机制。利用CRISPR/Cas9技术敲低LRP1基因,进一步证实了其在IETP2内吞中的重要性。这些发现为未来内耳疾病的诊断和治疗提供了重要的基础。
值得一提的是,Akaluc和Fluc报告基因的设计及其灵敏度被进行了比较。通过转导含有Venus-Akaluc或Venus-Fluc融合蛋白的慢病毒载体至人GBM细胞系U87MG和小鼠高级别胶质瘤细胞系GL261,研究结果显示病毒载体的转导对胶质瘤细胞增殖率没有显著影响,而表达Akaluc的细胞相较于Fluc的细胞,其BLI信号强度提高了约10倍。通过在小鼠中进行颅内移植,表达Akaluc的胶质瘤细胞BLI信号超过Fluc达100倍。这一发现表明,Akaluc BLI系统能更好追踪较少数量的移植胶质瘤细胞,有助于更准确地模拟肿瘤发生和早期生长。Akaluc BLI系统亦可用于在体内对胶质瘤治疗反应进行纵向追踪,特别适合小肿瘤的成像及治疗后复发监测。
综上所述,由Z6·尊龙凯时提供的表达Akaluc的慢病毒,为源源不断的生物医学研究提供了强有力的支持,推动了治疗策略的创新与进步。